玩家将面对多种敌对生物和野生动物，它们分布在不同的地图区域，具有独特的攻击方式和生态习性。感染者是最基础的敌人，包括普通感染者、快速感染者以及特殊变异体，如拉扎罗夫等高级变异生物。这些感染者通常在废弃城市、森林等区域游荡，部分会主动攻击玩家，而特殊变异体往往出现在副本或任务中，需要团队协作才能击败。
野生动植物是资源采集的重要来源，同时也是潜在威胁。秋日森林和星河峡谷等地图中常见的野生动物包括鹿、狼、熊等，鹿通常被动逃跑，而狼和熊会主动攻击玩家。植物资源如麻、浆果、蘑菇等可用于制作食物或药品，但部分植物如咬人荨麻具有攻击性，接触后会受到伤害。采集时需注意周围环境，避免被野生动物突袭或植物陷阱所伤。
特殊区域如多贝雪山和沙石堡还隐藏着更危险的生物。多贝雪山的严寒环境中存在雪狼和雪原熊，攻击力较高且耐寒，玩家需穿戴防寒装备应对。沙石堡的荒漠地带则有蝎子和沙蛇，它们的毒液攻击会附加持续伤害效果，建议携带解毒剂。这些区域的地下洞穴或废墟中可能潜伏着精英敌人，击败后可获得稀有资源。
水下工厂和方舟市等新地图引入了水生敌对生物，如变异鱼群和深海感染者。这些敌人在水环境中行动敏捷，玩家需配备潜水装备和水中武器才能有效应对。部分水生植物如珊瑚和海藻可采集，但需警惕附着在其中的毒刺生物。探索时建议组队行动，以应对突发战斗和资源争夺。
游戏中还存在人形敌人，如帝国士兵和掠夺者，他们拥有与玩家相似的战斗AI，会使用枪械、陷阱等策略攻击。这类敌人通常占据据点或巡逻特定路线，击败后可能掉落武器零件等高价值物品。面对人形敌人时，战术掩体和远程武器更为有效，近战容易陷入包围。
熟悉各类生物的分布和行为模式，是长期生存的关键。
